Identificación de antígenos inmunorreactivos de Leptospira interrogans / Identification of immunoreactive antigens of Leptospira interrogans

Se estudió un lote de 28 sueros de llama (Lama gama) de la provincia de Jujuy, Argentina, a fin de identificar antígenos inmunorreactivos contra Leptospira interrogans. Se utilizaron distintas preparaciones antigénicas de la bacteria para estudiar la inmunorreactividad mediante microaglutinación (MAT), ELISA y Western inmunoblot. Un pool de sueros bovinos positivos a la MAT fue empleado como control. Todos los sueros de llama fueron negativos mediante MAT e igual resultado se observó mediante ELISA. Dos de los 28 sueros de llama y el pool de sueros bovinos positivos, al ser evaluados por Western inmunoblot, arrojaron resultados positivos y permitieron identificar proteínas inmunorreactivas. Por MALDI-TOF se logró establecer que la proteína asociada a los dos sueros de llama inmunorreactivos era una flagelina periplásmica de Leptospira interrogans serovar Lai STR, mientras que la asociada al pool de sueros bovinos positivos a Leptospira sp. se trataba de una lipoproteína de la membrana externa de Leptospira interrogans serovar Ballum, LipL21. Estas proteínas podrían ser utilizadas en el diseño de un nuevo ELISA aplicado al diagnóstico temprano de leptospirosis, ya sea en distintos tipos de ganado como así también en reservorios silvestres.

A batch of 28 llama (Lama gama) sera from Jujuy province in Argentina was studied in order to identify immune reactive antigens to Leptospira interrogans. Different antigenic preparations from the bacterium were used to study the immune reactivity by the microagglutinattion (MAT), ELISA and Western immunoblot tests. A control pool of positive bovine sera was used. All the llama sera were negative to MAT as well as to ELISA. Two of the llama sera and the positive bovine sera pool rendered positive results when evaluated by Western immunoblot, allowing the identification of immune reactive proteins. These proteins were identified by MALDI-TOF. A periplasmic flagellin of Leptospira interrogans serovar Lai STR called FlaB1 was identified from the reactive llama sera, and an external membrane lipoprotein of Leptospira interrogans serovar Ballum called LipL21 was identified from the pool of bovine positive sera. These proteins could be used in a new ELISA applied to the early diagnosis of leptospirosis in different kind of cattle or wild reservoirs.

Evaluation of a QIAamp DNA stool purification kit for Shiga-toxigenic Escherichia coli detection in bovine fecal swabs by PCR / Evaluación del kit QIAamp DNA stool purification para la detección de Escherichia coli productor de toxina Shiga en hisopados de materia fecal bovina por PCR[

A commercial kit intended for Taq polymerase inhibitor removal was tested to detect Shiga-toxigenic Escherichia coli (STEC) by polymersase chain reaction (PCR) directly from cattle fecal samples. Forty-five samples were analysed for the presence of stx genes. Results were compared to those obtained by two other methods: amplification of DNA purified by a non-commercial procedure (heat lysis protocol), and amplification of DNA from samples cultured in solid media, commonly used in our lab. Identical numbers of positive samples (33/45, 73 %) were obtained with the QIAamp DNA stool purification kit and the culturing procedure, suggesting an adequate removal of inhibitors that interfere in PCR amplification from the feces. Besides, the number of positive samples detected using DNA purified by the non-commercial protocol was lower, 25/39 (64%) than that achieved by using the kit. In conclusion, the use of the QIAamp DNA stool purification kit provided a rapid stx gene detection by PCR in bovine fecal samples.

Un kit comercial diseñado para la eliminación de inhibidores de la polimerasa Taq fue ensayado para la detección de STEC por PCR en muestras fecales de bovinos. Cuarenta y cinco muestras fueron evaluadas por la presencia de genes stx. Los resultados fueron comparados con aquéllos obtenidos por otros dos métodos: amplificación de ADN purificado por un procedimiento no comercial (protocolo de lisis por calor), y amplificación de ADN de muestras cultivadas en medio sólido, comúnmente usado en nuestro laboratorio. El mismo número de muestras positivas (33/45, 73 %), fueron obtenidas con el QIAamp DNA stool purification kit y el procedimiento de cultivo, sugiriendo una eliminación adecuada de inhibidores que interfieren con la amplificación en materia fecal. Por otro lado, el número de muestras positivas detectadas usando ADN purificado por el protocolo no comercial fue menor, 25/39 (64%). En conclusión, el uso del kit QIAamp DNA stool purification permitió una detección rápida de genes stx por PCR en muestras fecales bovinas.

El genotipo de Mycobacterium bovis mayoritario en la Argentina lo es también en las islas Británicas: la tuberculosis bovina provino de Gran Bretaña? / [The genotype of the principal Mycobacterium bovis in Argentina is also that of the British Isles: did bovine tuberculosis come from Great Britain?]

Bovine tuberculosis is a highly prevalent animal disease in Argentina. In this work evidence was obtained showing that a major Mycobacterium bovis group in Argentina had been introduced with the bovine bulls imported from the United Kingdom at the end of the XIX century. This evidence came from two sources: historical, obtained by bibliographical references, and from laboratory results, using a molecular typing method called spoligotyping. These strains are also present in other countries that introduced cattle from the same origin.